蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。

与Southern Blot或Northern Blot杂交方法类似,但Western Blot法采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。

天能科技凭借多年经验,通过自主开发、国际合作及引进相结合,研发出了具有极佳的性能价格比的系列产品,为从事分子生物学领域的研究人员提供了先进的研究工具。

化学发光成像系列 电泳系列 相关试剂

化学发光成像系列

Tanon 系列全自动化学发光成像分析系统点击查看产品

适用于化学发光检测

Tanon 系列化学发光成像分析系统,可对ECL发光等直接成像,获得实验结果。以往我们常使用暗室曝光来进行检测,但暗室建造浪费空间,曝光步骤繁琐,冲洗X胶片时会接触到毒性化学试剂,而现在使用Tanon系列成像系统采用全进口深度制冷CCD相机及专业型大光圈电动镜头,有效的保证了对微弱信号的捕捉能力。相比传统方法,Tanon 系列成像系统具有更高的线性范围,能够完美的呈现极强与极弱信号,具有更好信噪比,极低的背景噪点,更加客观真实的体现实验数据。

实验项目:Western Blot

检测方式:Tanon 5200化学发光成像系统

曝光时间:120sec

实验项目:菌落-LUC荧光素酶

检测方式:Tanon 5200化学发光成像系统

曝光时间:30sec

实验项目:Northern Blot

检测方式:Tanon 5200化学发光成像系统

曝光时间:60min

实验项目:蛋白生物芯片

检测方式:Tanon 5200化学发光成像系统

曝光时间:120sec

传统X光片法

1. 需要暗房,胶片,显影液,定影液等耗材。

2. 动态范围窄,仅2个数量级,不能兼顾最弱和最强信号。

3. 曝光时间不好把握,需要不断的摸索。

4. 结果需要扫描,不宜定量分析。

Tanon 5200化学发光成像系统

1. 灵敏度高,数据结果可用于定量分析;

2. 不需要暗房、胶片,无需耗材;

3. 较宽的动态范围,能兼顾较弱信号与较强信号。

4. 结果为电子文档,方便数据分析、存档和长期保存。

Tanon 5200  VS Competitor

1. 灵敏度差异:Tanon 5200采用全进口深度制冷CCD相机及专业型大光圈电动镜头,有效的保证了对微弱信号的捕捉能力。

2. 线性度差异:Tanon 5200具有更高的线性范围,能够完美的呈现极强与极弱信号,更加客观的体现实验数据。

3. 清晰度差异:Tanon 5200具有更好信噪比,极低的背景噪点让图像更加真实。

 

我们的仪器曾出现在以下文献中:

Xingrong Du, Hao Shi, Jiang Li, Yongli Dong, JieLiang Liang, Jian Ye, Shanshan Kong, Shujing Zhang, Tao Zhong, Zengqiang Yuan, Tian Xu, Yuan Zhuang, Biao Zheng, Jian-Guo Geng and Wufan Tao. (2014). Mst1/Mst2 Regulate Development and Function of Regulatory T Cells through Modulation of Foxo1/Foxo3 Stability in Autoimmune Disease. The Journal of Immunology, 2014, 192: 1525–1535.

Lulu Hu, Ze Li, Jingdong Cheng, Qinhui Rao, Wei Gong, Mengjie Liu, Yujiang Geno Shi, Jiayu Zhu, Ping Wang and Yanhui Xu. (2013). Crystal Structure of TET2-DNA Complex: Insight into TET-Mediated 5mC Oxidation. Cell, 2013, 155: 1545–1555.

Yue Lou, Xiao-Feng Xu, Jun Zhu, Jing-Nan Gu, Stephen Blackmore & Zhong-Nan Yang. (2014). The tapetal AHL family protein TEK determines nexine formation in the pollen wall. NATURE COMMUNICATIONS, 2014, 5:3855, DOI: 10.1038/ncomms4855

Su-Su Tang, Miao-jin Ji, Lan Chen, Mei Hu, Yan Long, Yong-qi Li, Ming-xing Miao, Jia-chang Li, Ning Li, Hui Ji, Xi-jing Chen and Hao Hong. (2013). Protective effect of pranlukast on Aβ1–42-induced cognitive deficits associated with downregulation of cysteinyl leukotriene receptor 1. International Journal of Neuropsychopharmacology, 2013, doi:10.1017 / S1461145713001314

Si-Hui Zhonga, Jun-Zhong Liua, Hua Jinb, Lin Lina, Qun Lia, Ying Chena, Yue-Xing Yuana, Zhi-Yong Wang, Hai Huanga, Yi-Jun Qie, Xiao-Ya Chena, Hervé Vaucheretf, Joanne Chory, Jianming Li, and Zu-Hua He. (2012). Warm temperatures induce transgenerationalepigenetic release of RNA silencing by inhibiting siRNA biogenesis in Arabidopsis Si-Hui. PNAS, 2012, www.pnas.org/cgi/doi/10.1073/pnas.1219655110

Su-Su Tang, Hao Hong, Lan Chen, Zhen-lin Mei, Miao-jin Ji, Guo-qing Xiang, Ning Li, Hui Ji. (2013). Involvement of cysteinyl leukotriene receptor 1 in Ab1e42-induced neurotoxicity in vitro and in vivo. Neurobiology of Aging 35 (2014) 590e599

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电泳系列

VE 180 微型垂直电泳槽点击查看产品

SDS-PAGE相关

VE 180 微型垂直电泳槽是用来对少量的核酸及蛋白质样品进行垂直电泳的装置,玻璃板与垫条的一体化设计确保垫条表面及垫条制胶密封端的平整,彻底防止漏液。

备选多种厚度间隔的垫条玻璃板和制胶梳子,可以满足不同上样量需要。可同时运行二块8.3×7.3cm的凝胶,做到一槽多用,节省实验空间及经费。

VE 186 转移电泳槽点击查看产品

膜印迹相关

VE 186 转移电泳槽是用来对少量核酸及蛋白质样品进行转移电泳的装置。专用开启式转移胶架,操作简便。专用槽内制冰盒,可预制冰块置于槽内,在转移电泳过程中起降温作用。可同时转印二块8.3×7.3cm胶,做到一槽多用,节省实验空间及经费。

VE 386 半干转移电泳槽点击查看产品

膜印迹相关

VE 386 半干转移电泳槽是核酸及蛋白质样品进行快速转移电泳的装置。最大可转印24×16cm的凝胶,操作简便,高效快速,节省实验空间及经费。

EPS 300 电泳仪点击查看产品

常规电泳相关

EPS 300 电泳仪应用微电脑和开关电源技术,与传统的电泳仪相比有着不可比拟的优点,可选择定时与计时输出,输出电压稳定,并且具有输出短路保护,未接负载停止输出电压/电流等功能。EPS-300 电泳仪适合于做常规电泳实验。

相关试剂

ChemistarTM High-sig ECL Western Blotting Substrate点击查看产品

发光灵敏度:目前一般的发光液可以检测到pg到fg级别的蛋白含量。实验者应根据实际实验条件使用合适的灵敏度发光液。

发光稳定性:发光不稳定的增强剂容易发生信号淬灭,即快速消耗发光底物,在几秒钟内发出强光,又在几秒内迅速消逝,导致无法检测到信号。

本底背景:化学发光反应对本底的影响非常敏感,因此要得到完美的实验结果要保证试剂的特异性。

BiostepTM Prestained Protein Marker点击查看产品

 

Biostep蛋白Marker包含10种预染的已知分子量标准蛋白质, 分别为10kD(绿), 15kD, 25kD, 35kD, 40kD, 55kD, 70kD(橙), 100kD, 130kD及170kD。可直接观察蛋白质电泳及清晰地判断WesternBlot的转移效果。经SDS-PAGE凝胶电泳后转移到PVDF或NC膜上可得清晰彩色蛋白条带。

BiosafeTM 核酸染料点击查看产品

 

BioSafe是一种新型的聚次甲基染料,其不能穿透细胞膜,但可以和游离的DNA高效结合,是一种高灵敏的核酸染料,与EB染料灵敏度相当。经Ames实验验证,BioSafe染料无致突变活性,因此不具有致癌毒性,是一种安全的核酸染料。废弃的BioSafe在环境下会自然分解,因此无需特殊处理。